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PCR e Test Molecolari per COVID-19

Articolo approvato dal Comitato editoriale di labtestsonline.org ed in corso di revisione da parte del Comitato editoriale italiano

In Sintesi

Perché?

Per diagnosticare la presenza di un'infezione in corso da SARS-CoV-2, il nuovo ceppo di coronavirus che causa la malattia da coronavirus 2019 (COVID-19).

Quando?

Principalmente, in soggetti sintomatici o per confermare il risultato del test antigenico o del test rapido. Talvolta, può essere richiesto a scopo di screening in soggetti asintomatici, ad esempio in seguito a sospetta esposizione al virus SARS-CoV-2. 

Il campione

Un campione di cellule prelevato dal tratto respiratorio superiore tramite tampone nasofaringeo (NF), tampone del naso e/o della gola o, talvolta, un campione di saliva.

La preparazione

No, nessuna.

L'Esame

Il test molecolare per COVID-19 viene utilizzato per diagnosticare la presenza di un'infezione in corso da SARS-CoV-2, il nuovo ceppo di coronavirus che causa la malattia da coronavirus 2019 (COVID-19). A tale scopo, il test molecolare maggiormente utilizzato in laboratorio è la reazione a catena della polimerasi con trascrittasi inversa, nota anche come RT-PCR. La PCR e i test molecolari si basano sull'identificazione del materiale genetico del virus in un campione del tratto respiratorio del paziente. Questi test sono considerati il "gold standard" per la diagnosi di COVID-19.

L'esecuzione del test prevede l'isolamento del materiale genetico a partire da un campione respiratorio del paziente e la successiva moltiplicazione (amplificazione) in milioni di copie di corte sequenze di DNA. Tramite questo processo di amplificazione è possibile rilevare la presenza di SARS-CoV-2 anche a partire da piccole quantità di DNA.

Il materiale genetico che viene ricercato è rappresentato da acidi nucleici ed il processo di moltiplicazione delle copie di DNA è noto come amplificazione; per questo, tale tecnica di laboratorio prende il nome di amplificazione dell’acido nucleico (NAAT).

Sono disponibili differenti metodologie per eseguire questo tipo di esame di laboratorio. La reazione a catena della polimerasi con trascrittasi inversa (RT-PCR) è la più comunemente utilizzata nei test per COVID-19. Alcuni esempi di altri metodi d'analisi che possono essere utilizzati per l'amplificazione dell’acido nucleico (NAAT) includono:

  • Amplificazione isotermica mediata dal loop (LAMP)
  • Amplificazione mediata da trascrizione (TMA)
  • Reazione di amplificazione con endonucleasi nicking (NEAR)
  • Amplificazione per spostamento del filamento (SDA)
  • Brevi ripetizioni palindromiche raggruppate e regolarmente intervallate (CRISPR)
  • Amplificazione elicasi-dipendente (HDA)

Tali tecniche di laboratorio non vengono utilizzate esclusivamente per COVID-19, ma possono rilevare la presenza anche di altri virus. Inoltre, sono disponibili nuovi test molecolari in grado di distinguere, all'interno dello stesso campione, tra il virus dell'influenza e il virus SARS-CoV-2.

Come e Perchè

Come viene raccolto il campione per l'esame?

Il campione respiratorio viene ottenuto piegando all’indietro la testa del paziente ed inserendo (per 7-9 cm) un tampone (simile ad un lungo cottonfioc) nelle narici, fino a toccare la parete posteriore del rino-faringe, dove viene lasciato per alcuni secondi e quindi ruotato alcune volte prima di disinserirlo. Il campione deve essere prelevato da entrambe le narici. Alternativamente, è possibile ottenere un campione dalle vie respiratorie tramite tampone della parte anteriore del naso e/o della parte posteriore della gola (orofaringeo)

La procedura richiede meno di un minuto, può essere fastidiosa ed indurre prurito, lacrimazione e colpi di tosse, in particolare nel caso del tampone nasofaringeo.

Talvolta è possibile utilizzare un campione di saliva del paziente, ottenuto inserendo una quantità sufficiente di saliva in un contenitore di raccolta.

 

Domande Frequenti

È possibile eseguire il test a domicilio?

Attualmente, non esistono test approvati dall'FDA (Food and Drug Administration) per COVID-19 da eseguire a domicilio. Il suggerimento per i cittadini è sempre quello di rivolgersi in ogni caso alle Istituzioni, evitando accuratamente di intraprendere azioni individuali che possono comportare gravi danni non solo al soggetto singolo, ma all’intera comunità. Tuttavia, recentemente l'FDA ha approvato il primo test RT-PCR che include un kit per effettuare la raccolta di campioni nasali a domicilio, che dovranno essere poi spediti ai laboratori per le analisi.

Risorse per i Professionisti

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Fonti

Fonti utilizzate nella revisione corrente

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